无花果和无花果叶中蛋白酶的变化规律研究开题报告

 2022-07-26 14:08:07

1. 研究目的与意义

无花果蛋白酶是一类巯基蛋白酶,主要存在于无花果的乳胶、叶及花托蛋白质中,是一种用途广泛的植物蛋白酶[1]。无花果蛋白酶除参与蛋白质的分解与迁移外,还与细胞信号的传导有关。从无花果树的胶乳和未成熟的果实乳汁中提取纯化而得到的蛋白酶,因其稳定性好、蛋白水解能力强且对多种蛋白质均具有很好的降解作用,因而被广泛应用于食品加工、工业生产和医疗卫生等领域[2]

研究不同因素(如产地、品种、生长期、日照时长和培育方式等)对无花果果实中蛋白酶含量的影响,可以总结出蛋白酶含量的变化规律。由于蛋白酶具有较强的蛋白质水解能力、凝乳特性和溶菌活力,这对无花果的品质、口感、耐藏性、生产加工特性等具有很大的影响。研究无花果蛋白酶的变化规律对提高其产品品质、优化加工工艺、延长货架期都有着重要的意义。

在无花果种植过程中,果实采收完成后,大量的无花果叶得不到利用,造成损失。研究无花果叶中蛋白酶含量变化与果实中蛋白酶变化之间的关系,并总结其相关性,可由此推断并掌握无花果的生长期、成熟期和其他指标,为无花果品质、成熟度检测提供一项新的数据。这会大大减少无花果农业生产中的浪费。研究无花果叶中蛋白酶的变化规律,还可以丰富无花果蛋白酶生产的原料来源,降低其成产成本,提高无花果的商业价值,增加无花果种植产业的经济效益。

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2. 研究内容和预期目标

研究内容

1 研究无花果蛋白酶的提取、分离及纯化技术;

2 研究不同因素对无花果和无花果叶中蛋白酶含量的影响。

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3. 国内外研究现状

无花果树是一种原产于亚洲西南部、地中海东部地区的树木,属桑科。无花果是人类培育的最初植物之一,是世界上一种重要的干旱新鲜的谷物消耗品。中国的栽培总面积约4.5万亩,属中国栽培面积最小的果树种类之一[2]。近年,随着人们保健意识的增强及对安全无污染食品需求的日益增长,长期以来以#8220;小杂果#8221;身份散种在百姓房前屋后的无花果进入广大消费者的视野[3]。无花果蛋白酶作为一种新型的植物蛋白酶,虽然在很多领域中的功能作用还未被开发或完全开发出来,但对于无花果蛋白酶的研究一直在不断进行,并取得一定进展。尽管如此,国内外对无花果果实及叶中蛋白酶的变化规律研究甚少。现将其国内外研究现状概述如下。

1 无花果蛋白酶的制备[4-7]

对无花果蛋白酶进行初步提取时,主要有水抽提法和有机溶剂沉淀法两种方法。水抽提法的操作步骤为:称取300 g净鲜果,-15 ℃预冷,加入预冷(-15 ℃)的pH4.5的水溶液(内含 Na2SO3#183;5H2O 0.18 g,Vc 0.12 g,EDTA60 mg)500 mL,捣碎机捣碎出汁,汁液置冰箱(-15 ℃)2 h,不时搅拌均匀,4层纱布减压抽滤。滤液于4 ℃下,3500 r/min离心15 min,上清液即为粗酶液。有机溶剂沉淀法的操作步骤为:将300 g鲜果洗净,-15 ℃预冷,加入预冷(-15 ℃)30%(V/V)乙醇(含4.7 g Na2SO3#183;5H2O)500 mL,压榨,粉碎出汁,4层纱布过滤,滤渣留存备用。滤液经3500 r/min,4 ℃下离心15 min,上清液加入预冷乙醇至75%(V/V)浓度,置冰箱(-15 ℃)过夜,次日置布式漏斗中快速抽干,加入-20 ℃丙酮脱水,抽取丙酮后得白色粉末,为无花果蛋白酶粗酶制剂。实验结果表明,相同条件下水抽提法的酶活力显然高出有机溶剂沉淀法[4]

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4. 计划与进度安排

研究计划及进度:

2022.12.26~2022.01.03熟悉课题、检索文献并整理;

2022.01.04~2022.02.28完成开题报告的撰写,对英文资料进行翻译,制定实验方案;

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5. 参考文献

[1]Duenas M, Perez-Alonso JJ, Santos-Buelga C, et al. Anthocyanin composition in fig (Ficus carica L.)[J]. Journal of Food Composition and Analysis,2008,21:107-115.

[2]郭冬青,纪付江,程绍杰,等. 无花果蛋白酶的研究进展[J].北方园艺, 2010(7):210-211.

[3]汪允侠,周永生. 无花果罐头加工工艺研究[J].食品工业科技,2007(1):127-128.

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