稻瘟病菌脂蛋白受体MoLrp1的功能分析开题报告

 2023-02-19 08:02

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

一、本课题的意义

稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病是水稻生产上最具毁灭性的病害之一,每年可造成高达35%-50%的损失,在我国常年均有不同程度的发生,局部田块甚至颗粒无收[1,2] 。稻瘟病是由真菌稻梨孢菌(Pyricularia oryzaeCav.)引起的水稻病害,主要以分生孢子和菌丝的形式侵染植株[3]

稻瘟病的防治措施主要以抗病品种与化学农药为主,但是稻瘟病菌易发生变异,抗病品种在推广3-5年后,新的致病型的出现,导致品种丧失了抗性;单一化学药剂的常年使用导致抗药性群体产生导致药剂失去防治效果[4]。因此迫切需要从分子水平解析病菌致病机理,研究分析稻瘟病菌脂蛋白受体MoLrp1的功能,对进一步了解稻瘟病菌作用机制、培育新型抗病品种、有效防治稻瘟病害具有重要意义,也为挖掘新的稻瘟病菌杀菌剂作用靶标、制定新的稻瘟病控制策略提供了理论依据。

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2. 研究的基本内容和问题

一、研究目标

水稻是世界上最重要的粮食作物之一,稻瘟病目前是世界上分布最广危害最重的病害之一,如何有效控制稻瘟病的发生和防治对保障粮食安全具有重要意义。MoLrp1基因现仅在人类研究和动物细胞方面研究有所涉及,而在丝状真菌包括稻瘟病菌领域内还没有研究,MoLrp1调控代谢的分子机制尚未报道,如何调控稻瘟病菌脂肪酸代谢的具体机制尚不清楚,因此,本课题拟针对上述问题开展研究工作,了解稻瘟病菌脂蛋白受体MoLrp1的作用及功能,从分子水平解析稻瘟病菌的致病机制,从而为抗病育种和特异性新靶标药物开发提供新的策略和杀菌剂靶标,为稻瘟病的防治提供新的策略。

二、研究内容

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3. 研究的方法与方案

一、研究方法、技术路线、实验方案

1.供试菌株及培养条件

野生型菌株Guy11由本实验室保存,突变体菌株MoLrp1及其互补菌株由本研究通过对Guy11菌株敲除及对突变体菌株回补获得。所有菌株28℃黑暗培养于CM平板,生长约5-7天后用于实验。短期保存于11℃ PDA斜面,为保证菌株活性,一般半年做一次转接继代保存,长期保存于-20℃冰箱干燥滤纸片。

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4. 研究创新点

Lrp1基因现仅在人类研究和动物细胞方面研究有所涉及,而在丝状真菌包括稻瘟病菌领域内还没有研究。MoLrp1在稻瘟病菌中的功能尚未报道,MoLrp1调控稻瘟病菌脂肪酸代谢的具体机制尚不清楚。从分子水平解析稻瘟病菌的致病机制,研究分析稻瘟病菌脂蛋白受体MoLrp1的功能作用及其对稻瘟病菌的致病性影响等,为抗病育种和特异性新靶标药物开发提供新策略和杀菌剂靶标,为稻瘟病防治提供新的策略。

5. 研究计划与进展

2018年10月至11月:查找相关文献,初步研究了解LRP1国内外研究现状,学习了解稻瘟病菌研究现状和响应胁迫的机制,了解一些基本的实验原理与技术,如Blast、PCR、EMSA、总蛋白提取、酵母质粒提取、大肠杆菌转化等,并进行相关实验。

2018年12月至2019年1月,探究稻瘟病菌脂蛋白受体MoLrp1的功能及作用,培养供试菌株,进行目的基因的敲除与回补实验、并对敲除突变体和回补体的基本表型进行测定。

2019年2月至4月,补充未完成实验,整理结果,撰写论文。

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