母鼠日粮添加胆碱对断奶IUGR仔鼠生长及脂代谢的影响开题报告

 2023-02-11 12:02

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

多胎动物在母体子宫内发育迟缓(IUGR)会普遍导致胎儿出生时低体重或极低体重,组织器官发育不良[1],并程序化补偿生长导致个体生长速度和脂肪沉积量高于同类非IUGR个体[2,3],并由于体内脂肪过多严重影响个体的健康水平及成产能力。这一现象也存在于人类社会中,若母体在孕期营养不良则会导致胎儿出生体重低于地方平均值,但在日后的成长过程中由于补偿生长的影响导致个体在生长发育过程中体重超重甚至肥胖,严重影响健康,这一现象已经趋于严峻不容忽视[4]

FLD是一种以肝脏甘油三酯过度累计为特征的代谢疾病。引起FLD的主要原因是肝脏脂肪酸合成、转运与氧化之间的平衡被破坏。除了过量饮酒、大量能量摄入以及遗传因素外,营养代谢紊乱也是其中原因之一[5]

缺乏胆碱会使合成脂蛋白的重要原料磷脂酰胆碱的合成量不足,进而引起肝脏脂蛋白合成减少,阻碍了脂肪向血液中转运这一通路,引起脂肪在肝脏内堆积,胆碱很可能通过胆碱氧化这一途径生成甜菜碱,继而通过蛋氨酸再甲基化途径间接参与S-腺苷甲硫氨酸的合成,进而以S-腺苷甲硫氨酸为活性甲基供体[6]参与甲基代谢促进肉碱合成[7],增强组织中脂肪酸氧化,提高组织对脂肪酸的降解,最终达到降低动物脂肪沉积的作用[8]

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2. 研究的基本内容和问题

本试验意在系统研究日粮添加胆碱对IUGR仔鼠生长、免疫及脂代谢方法的影响,为IUGR的防治提供依据。

(1)通过限饲日粮中添加胆碱研究其对宫内发育迟缓的影响,以及其对仔鼠出生后的生长、免疫及脂代谢的影响。

(2)样品的采集:仔鼠生长至21天断奶时称重、屠宰取血清,并取心、肝、脾、胰、肾、脑、脂肪组织等样品称重。

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3. 研究的方法与方案

一、对亲代的处理 取生长状态相同或相近的母鼠6只,采用阴道涂片镜检法确定怀孕0天,在温度、湿度适宜的环境下进行饲养,每日光照、黑暗时间为1:1,在怀孕第10天进行限饲。 ①正常组:饲喂基础日粮。 ②IUGR组:限饲50%基础日粮。 ③试验组:限饲50%基础日粮并添加2%胆碱。

二、取每只母鼠生理状态相似,体重接近的仔鼠共6只,公母各半,每组各取两公两母,以一公一母为一个单位送至其他两个组别中交叉哺乳,母鼠仍按照原有限饲方案继续饲养。

三、待仔鼠达21日龄时称重处死,取血清样品,分离分离仔鼠心、肝、脾、脂肪组织等组织样品并称重。 四、利用试剂盒测定血清总蛋白、葡萄糖、血脂(高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、甘油三酯、胆固醇)等生化指标。

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4. 研究创新点

现有的研究大都集中于胆碱对个体具有降低脂肪沉积量的作用;IUGR个体具有的程序性补偿生长方面,而对孕期母鼠限饲及限饲日粮中添加胆碱以期通过母体效应影响仔鼠脂代谢方面并无报道,故此为本论文的创新之处。

5. 研究计划与进展

现已完成动物饲养、IUGR仔鼠模型构建、组织取样及称重,未来进行血清生化指标测定,本试验预计可顺利完成。

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