1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）
文 献 综 述食源性大肠杆菌概述大肠杆菌(E. coli)最早由 Escherich 发现于1885年，作为条件致病菌的代表而广为人知，革兰氏染色反应呈红色显阴性，有着两端钝圆呈短杆状的形态特点，周生鞭毛且数量较少(5条以下)[1]。
致病性大肠杆菌按照生物学特性的差异可分为以下6类 ：肠出血性大肠杆菌（EHEC）、肠产毒性大肠杆菌（ETEC）、弥散黏附性大肠杆菌（DAEC）、 肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）、肠致病性大肠杆菌（EPEC）和肠黏附性大肠杆菌（EAEC）[2]。
作为兼性厌氧菌，大肠杆菌在有氧和无氧环境中均可生存，对环境有着较强的适应能力。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
一、需解决的问题：1、Cas12a蛋白在大肠杆菌DH5α中高效表达的最适条件的确定；2、如何提高Cas12a的表达量；3、优化CRISPR/ Cas12a的检测系统反应条件； 4、优化CRISPR/ Cas12a的检测灵敏度。
二、拟采用的研究手段：1、通过化学转化法，将pMBP-LbCas12a转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞，使其在特定原核生物或细胞内表达。
2、设置温度梯度，改变诱导表达的条件，确定最适诱导温度。
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