基于CRISPR/Cas14a系统快速检测金黄色葡萄球菌开题报告

 2023-04-03 09:04

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

文 献 综 述关于金黄色葡萄球菌的概述金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)也称金葡菌,隶属于葡萄球菌属,是革兰氏阳性菌代表,为一种常见的食源性致病微生物。

该菌最适宜的生长温度为37℃,pH为7.4,耐高盐,可在盐浓度接近10%的环境中生长。

金黄色葡萄球菌常寄生于人和动物的皮肤、鼻腔、咽喉、肠胃、痈、化脓疮口中,空气、污水等环境中也无处不在1。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

需解决的问题:1.Cas14a1蛋白在大肠杆菌DH5α中高效表达的最适条件的确定;2.如何提高Cas14a1的表达量;3.优化CRISPR/ Cas14a1的检测系统反应条件; 4.优化CRISPR/ Cas14a1的检测灵敏度。

拟采用的研究手段:1.通过化学转化法,将pLBH531_MBP-Cas14a1转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,使其在特定原核生物或细胞内表达。

2.设置温度梯度,改变诱导表达的条件,确定最适诱导温度。

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