麦粉及制品中烷基间苯二酚同系物的气相色谱质谱联用法的分析研究开题报告

 2022-08-11 09:08

1. 研究目的与意义

随着经济发展和国民营养健康意识逐渐增强,健康已经成为人们生活的重要主题[1]。麦粉及制品中富含烷基间苯二酚对人体健康有益的生物活性物质,越老越多的研究者对其产生了浓厚的兴趣,小麦作为人类膳食的主要原料,所具有的营养特征主要集中在小麦的皮层,小麦的外皮层和糊粉层构成了皮层,麸皮中除了含有较丰富的烷基酚类化合物以及B族维生素[2]。Wenkert等首次在小麦、黑麦等麦类中发现了烷基间苯二酚(ARs)[3]

烷基间苯二酚,又称5-N-烷基间苯二酚,是1,3间苯二酚环5位被含奇数个碳原子的烷基取代的一类衍生物的总称,是酚类脂制中的一种,具有两亲性,它在谷物酚中占很大的比重,ARs烷基链长短不一,某些ARs烷基链(脂肪链)上含有一到三个双键或存在酮基、羟基等取代基,且大都存在8、11、14位碳原子上,和含18个碳原子的不饱和脂肪酸非常相似。由于对ARs的同系物缺少系统命名法,跟脂肪酸命名方式一样,人们根据其链长和不饱和度对其命名。因此含有19个碳原子的饱和烷基链的ARs表示为C19:0[3]。一般来说,链长为15至27个碳原子(主要是奇数同系物)的ARs是可检测的[4]

烷基间苯二酚的提取方法:有机溶剂提取法、索氏抽提法、超临界二氧化碳萃取法(SC-CO2)、热正醇水混合提取方法。烷基间苯二酚的分析方法:薄层色谱法(TLC)、分光光度法、火焰离子化气相色谱法、高效液相色谱法、同位素标记法。本文讲述以乙酸乙酯为有机提取试剂,选取全麦粉和麸皮为样品,并通过单因素实验进一步优化测定方法中变量参数,对烷基间苯二酚含量测定方法进行了总结以及对其研究方法进行预测,以期达到对其同系物的气相色谱质谱联用法分析研究起到一个指导作用,对未来社会技术开发具有重要意义。

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2. 研究内容和预期目标

一、研究内容:

①全麦粉中烷基间苯二酚测定方法

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3. 国内外研究现状

关于烷基间苯二酚的研究迄今为止大约有了20多年的时间,但目前国内对优化烷基间苯二酚测定方法的研究还不完善,最近几年烷基间苯二酚得到了广泛关注和深入研究。例如:张珺,何义雁,朱香燕等建立了快速测定糙米中烷基间苯二酚的分光光度法,此法定量测定烷基间苯二酚,重复性试验相对标准偏差为0.24%,加标回收率为98.8%~100.4%。与传统方法Chromatography相比,该方法不需要将样品进行粉碎,不仅节省能源与人力,还能避免粉碎过程对活性成分的损失与损害,具有很好的推广价值[5]。王宇飞,张雪松,向雪松等以小麦和黑小麦为主要研究对象,建立液相-荧光法,采用析因设计探讨了提取试剂、提取方法、样品状态对ARS测定的影响,通过对比色谱条件和适宜荧光光波长建立ARs检测条件,在完成方法学评价基础上对部分市售麦类作物ARs水平进行测定,结果表明此法能高效分离全麦中ARs并进行准确测量,具有操作简单、灵敏度高、快速有效的优点[6]。Simon Hammann 等采用一种新的基于高温气相色谱-高分辨质谱联用的脂质谱分析方法,成功的应用于谷物脂类的分析,在若干谷物样品中检测到这些化合物(尽管浓度很低),只意味着应谨慎使用这些化合物作为藜麦或人体血浆中藜麦膳食摄入量的特定标记[4]

全谷物消费与降低几种慢性疾病的风险之间存在着关系,例如:肥胖、糖尿病、冠心病和一些其他癌症,然而,由于流行病学中使用的传统饮食评估方法固有的相对较大波动测量误差的影响,饮食-疾病的关联可能被过度或低估,通过使用使用标记物,建立全谷物摄入量的互补或替代测量,一组酚类脂质烷基间苯二酚已被认为全麦黑麦和小麦摄入量的有用标记物,克服了许多障碍[7]。烷基间苯二酚的生理生物活性有:①抑菌作用②对酶的抑制作用③对生物膜的作用④对肿瘤的抑制作用⑤抗氧化作用⑥与食品风味有关。

李秀梅研究谷物纤维摄入量和妊娠期糖尿病之间的关系。分析两组研究对象的血浆烷基间苯二酚代谢产物水平差异、血浆烷基间苯二酚代谢产物与其它指标相关性、血浆总烷基间苯二酚代谢产物对妊娠期糖尿病筛选检验效果影响。研究表明,血浆AR总代谢产物浓度的提升和GDM患病风险降低之间表现出明显相关性,相比于低浓度患者而言,高浓度患者的GDM风险率也明显下降[8]。刘贵友,刘中华.利用高效液相和质谱检测表明,该重组菌具有发酵生产5种不同ARS的能力,研究表明生物安全的宿主酿酒酵母具有发酵生产ARS的潜力[9]。韩粉丽,韩飞,范柳萍研究发现长期食用糙米和全麦,能有效的减少心血管疾病、糖尿病、癌症、便秘等发病率,对人类的健康十分有利[1]。杨春,李恒等对5-烷基间苯二酚诱导人结直肠癌细胞凋亡的机制探讨,证实了5ARs可诱导HT29及HCT116凋亡,并且可能与激活BAX、Caspase3、PARPI表达等比例相关,但是,结直肠肿瘤的发生发展其分子机制十分复杂[10]

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4. 计划与进度安排

2022年11月18日~2022年11月26日:确定实验题目,查阅相关文献,进行实验准备。

2022年11月27日~2022年11月30日:选取麦粉制品中不同种全麦粉和麸皮作为样品,确定烷基间苯二酚的前处理优化因素,熟悉仪器的使用。

2022年12月1日~2022年1月09日:熟练掌握全麦粉中烷基间苯二酚的测定方法,借助有机萃取法、酶标仪、旋蒸仪分析观察不同有机溶剂、选取条件、提取时间、料液比和提取次数值对烷基间苯二酚含量的影响,得出前处理优化最佳条件,为气相色谱联用法分析研究提供基础。

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5. 参考文献

[1]韩粉丽,韩飞,范柳萍.全麦粉营养成分及其与慢性病关系的研究进展[J].食品安全质量监测学报.2017,8(08):3022-3028

[2]于爽,夏玉琳,朱恩俊.不同剥皮程度对小麦粉烷基间苯二酚和B族维生素含量的影响[J].食品科技,2017,42(06):162-166

[3] 周厚德,刘玉环,李瑞贞等.全麦中烷基间苯二酚的研究概述[J].食品科学,2008,29(08):680-684

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