基于细胞融合技术的一种超高灵敏度的黄曲霉毒素单克隆抗体制备研究开题报告

 2022-08-16 05:08

1. 研究目的与意义

黄曲霉是我国境内粮食和饲料污染菌中最为常见的一种一种真菌毒素。黄曲霉分布极其广泛,目前,在粮食和油料作物的种子、乳类、乳制品类、发酵产品和饲料内,甚至在酒类和酶制剂中也都发现了黄曲霉毒素,可以说,黄曲霉与人们的日常生活息息相关,有人类活动的地方就有黄曲霉存在,因此可以说黄曲霉毒素污染时时刻刻都在威胁着人类的生命和财产安全。

黄曲霉毒素主要是由黄曲霉和寄生曲霉产生的毒性极强的次生代谢产物,黄曲霉毒素是一类结构类似的化合物的总称。在黄曲霉毒素家族中,常见的有黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2、M1 和 M2 等。早在 1988 年黄曲霉毒素 B1 被国际肿瘤研究机构(IARC)定为一级致癌物。AFB1 对人类而言,同样是一种肝脏毒,可引起人类肝癌和食道癌等多种疾病。AFB1与其他致病因素(如肝炎病毒)等对人类疾病的诱发具有叠加效应。研究发现,AFB1 中毒的病例临床症状表现为呕吐,腹泻,厌食和昏睡等。严重的话可导致肝脏和肾脏衰竭而死。调查结果显示,世界各地肝癌高发地区,当地食品中黄曲霉毒素污染相对就比较严重。

AFB1 存在于人们生活的角角落落,鉴于 AFB1 对人类生命和财产安全造成的巨大危害,在日常生活中如何避免 AFB1 对人们造成伤害成为摆在世界各国政府及科学家面前的棘手问题。近年来,随着生物、化学、物理等各个学科的快速发展,AFB1 检测方法日益成熟。高灵敏度,高精确度的检测仪器和高效简便的免疫分析方法也正逐渐应用于 AFB1 的检测。

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2. 研究内容和预期目标

研究内容:

1.免疫方案的设计

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3. 国内外研究现状

早期检测技术比较落后的条件下,生物检测法是人们用来检测样品中 AFB1的常用方法,生物检测方法主要包括雏鸭法、植物和微生物鉴定法、水生动物鉴定法、豚鼠鉴定法和组织培养法等,其中,雏鸭法是人们常用的方法,其原理是雏鸭胆管上皮细胞异常增生的程度和给予的 AFB1 的量存在一定的相关关系。实验结束时,取出雏鸭的一块肝组织,经固定,最后做组织学观察,并根据胆管上皮细胞异常增生的程度进行分级,以此来判断样品中 AFB1 含量的多少。

目前实验条件下,常用来检测 AFB1 的方法通常是:薄层层析法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)、气质联用法(LC-MS)及免疫化学分析法等。

4. 计划与进度安排

1.学习相关理论,掌握基本概念和要求,完成开题报告 2周

2.学习相关理论知识,下载和学习相关工具的使用 2周

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5. 参考文献

[1] 谢珲,章先,王歆,凡鹏程,时玉菲,方维焕.黄曲霉毒素B1单克隆抗体的制备及间接竞争ELISA检测技术研究[J].微生物学通报,2015,42(10):2033-2040.

[2] 肖智,李培武,张奇,张文,丁小霞.高特异性黄曲霉毒素B_1单克隆抗体的制备及特性研究[J].中国油料作物学报,2011,33(01):66-70.

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